一种化合物皮肤致敏体外评估细胞模型及其构建方法
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华南理工大学
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CN201711335463.3
发明
已下证
2020-07-28
专利转让
本发明公开一种化合物皮肤致敏体外评估细胞模型及其构建方法。该细胞模型的构建方法包括如下步骤:利用CRISPR/Cas9设计并构建sgRNA表达载体;设计并构建能将连接自裂解肽序列的报告基因定点敲入HMOX1基因的表达框内的同源重组载体;将同源重组载体,与hCas9质粒、sgRNA表达载体共转染细胞,进行单克隆化扩大培养,即得细胞模型。本发明通过CRISPR/CAS9结合细胞单克隆技术,获得HMOX1基因终止密码子前敲入荧光素酶基因的HaCaT细胞模型。该细胞模型实现荧光素酶基因与HMOX1基因的同步表达,从而有效分辨致敏化合物和非致敏化合物,为化合物致敏性研究提供更特异,更灵敏的细胞模型。
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