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一种适用于酵母多基因敲除的CRISPR/Cas9系统及其构建方法和应用

发布者：

系统发布

联系方式：

平台代办

申请（专利权）人：

广东省科学院微生物研究所(广东省微生物分析检测中心)

发明（设计）人：

价格类型：

一口价

价格：

专利号：

CN202011518251.0

分类名称：

专利类型：

发明

专利状态：

已下证

授权日期：

2022-09-06

合作方式：

开放性许可

摘要：

本发明公开了一种适用于酵母多基因敲除的CRISPR/Cas9系统及其构建方法和应用。本发明构建了适用于酿酒酵母多基因敲除的CRISPR/Cas9载体,并对其中的毒素抗性基因pdr5、pdr10和pdr15进行敲除,并通过抗毒实验验证毒素敏感型酿酒酵母的抗毒效果。本发明提供了酵母甚至其他真菌的多基因敲除CRISPR/Cas9系统敲除方法,并为其他毒素抗性基因的抗毒效果的验证提供了可靠的模式菌株。本发明通过在同源修复模板中提前引入终止子实现基因的失活,因此本发明提供的多基因敲除方法具有载体构建简单、敲除效率高、成本低等优势。因此可以广泛应用于酵母及丝状真菌的多基因敲除,从而促进酵母及丝状真菌的基因工程改造。

附图：